Электрофорез белков сыворотки крови используется в ветеринарной медицине для выявления диспротеинемий и классификации случаев гиперглобулинемии.
Между лошадьми и ослами описаны многочисленные различия в клинических патологических параметрах, включая расхождения в гематологических, биохимических показателях и референтных диапазонах гемостаза. Поэтому экстраполяция данных между лошадьми может привести к ошибочной диагностике, ненужному лечению и увеличению затрат. Электрофорез белков сыворотки (ЭБС) является наиболее широко используемым методом для специфического количественного определения фракций белков сыворотки в ветеринарной медицине. ЭБС позволяет выявлять качественные отклонения в основных белках для дифференциации причин диспротеинемий, прежде всего тех, которые вызывают гиперглобулинемию, таких как моноклональные и поликлональные гаммапатии. Кроме того, хотя спектрофотометрические методы считаются золотым стандартом, ЭБС также может использоваться для определения концентрации альбумина в сыворотке на основе общей концентрации белков сыворотки и процентного содержания альбумина. Однако ни корреляция между этими двумя методами, ни влияние различных фракционирований альбумина на электрофореграмму (например, исключение катодного плеча из пика альбумина) не были описаны у лошадей .
В ветеринарных центрах рутинно применяются несколько методов электрофореза белков (ЭФБ), таких как электрофорез в агарозном геле (ЭАГГ) и электрофорез на ацетате целлюлозы (ЭАЦ). Однако в настоящее время стандартным методом в медицине человека является капиллярный зонный электрофорез (КЗЭ), который во многих крупных ветеринарных лабораториях заменяет эти более ранние методы. КЗЭ позволяет быстро и эффективно разделять белки, используя малые объемы образцов. Кроме того, этот метод обладает превосходными разрешающими и дифференцирующими возможностями по сравнению с ЭАГГ или ЭАЦ и позволяет выявлять незначительные отклонения в миграции белков, такие как бисальбуминемия.
Характеристика сывороточных белков в ветеринарной медицине лошадей.
Хотя для AGE и ACE у лошадей существуют референтные интервалы (РИ), РИ для CZE у этого вида животных не установлены. Что касается ослов, то, несмотря на то, что в нескольких исследованиях были представлены результаты для AGE, ACE и CZE, стандартизированные пределы для каждой белковой фракции отсутствуют, а в некоторых исследованиях даже отсутствует графический пример электрофореграммы.
Бисальбуминемия (или аллоальбуминемия) — редкое состояние, характеризующееся наличием двух пиков в альбуминовой фракции на электрофореграмме. В медицине человека это явление связывают с точечными мутациями, патологическими состояниями, такими как сахарный диабет или ревматоидный артрит, или с приемом лекарственных препаратов. Хотя существуют отдельные сообщения о бисальбуминемии у лошадей, распространенность этого явления у лошадей или его связь с какими-либо заболеваниями остается неизвестной.
Таким образом, цели исследования, проведенного Кармен Дэвис , Франсиско Дж. Мендосой , Аделаидой Де Лас Эрас и Алехандро Пересом Эсихой с факультета ветеринарной медицины Университета Кордовы, заключались в следующем: установить показатели резистентности к капиллярному электрофорезу (КЭ) у здоровых лошадей и ослов и изучить влияние возраста и пола на эти параметры; определить корреляцию между концентрациями сывороточного альбумина, измеренными спектрофотометрическим методом, и концентрациями, рассчитанными методом КЭ, у обоих видов животных; и изучить распространенность бисальбуминемии у здоровых лошадей и ослов.
Референтные интервалы для лошадей и ослов
Образцы крови были собраны в пробирки с ЭДТА и сепаратором сыворотки путем венепункции яремной вены у 49 ослов, 50 лошадей и 20 кобыл с ферм, расположенных в разных районах Испании. Все животные считались здоровыми на основании клинического анамнеза, физического осмотра (частота сердечных сокращений и дыхания, температура, цвет слизистых оболочек, время капиллярного наполнения, моторика кишечника и пульс на пальцах) и общего анализа крови.
Были обнаружены существенные различия в процентном содержании и концентрации каждой белковой фракции (за исключением процентного содержания β-глобулинов) между двумя видами, что подчеркивает необходимость видоспецифических IR . «В нашем исследовании у ослов были значительно более низкие уровни альбумина и α1-глобулина, но более высокие процентные содержания и концентрации α2- и γ-глобулина, чем у лошадей», — отметили они в качестве примера.
Возрастные и половые различия в фракциях глобулина наблюдались также у лошадей, но не у ослов.
Что касается распространенности бисальбуминемии в образцах сыворотки крови здоровых лошадей и ослов, сообщается, что она была обнаружена у 18 из 50 здоровых лошадей (с распространенностью 36%) . Распределение бисальбуминемии было достаточно равномерным среди возрастных и половых групп, хотя это изменение чаще наблюдалось у самцов (12/30, 40%), чем у самок (6/20, 30%), и, по-видимому, увеличивалось с возрастом.
Бисальбуминемия у ослов встречалась редко.
«Согласно нашим результатам, бисальбуминемия является распространенным явлением у лошадей: более трети здоровых животных (обоих полов и всех возрастов) демонстрируют это отклонение», — добавили они. Они также отметили, что это не коррелирует с какими-либо изменениями в процентном содержании белков, измеренном методом капиллярного зонного электрофореза (КЗЭ), или со спектрофотометрическими результатами. С другой стороны, бисальбуминемия редко встречается у ослов : она была обнаружена только у двух здоровых животных.
«Это исследование — первое, в котором описаны референтные интервалы (РИ) для капиллярного зонного электрофореза (КЗЭ) у ослов и лошадей», — добавляют они. Поскольку результаты КЗЭ значительно различались между здоровыми лошадьми и ослами , «рекомендуются видоспецифические РИ». У кобыл наблюдались более высокие концентрации α2- и β-глобулина, чем у жеребцов, и аналогичные различия наблюдались между молодыми лошадьми (<5 лет) и лошадьми в возрасте от 5 до 10 лет. В заключение они подчеркивают, что бисальбуминемия, по-видимому, является распространенным явлением у здоровых лошадей, но редко наблюдается у ослов.
